على قاعة أبن الهيثم في كلية العلوم بجامعة القادسية جرت مناقشة الدراسة المُعَدة من قبل الطالبة راوية حسين علي الحداد تحت عنوان ددراسة وصفية وجزيئية لجرثومة Providencia المعزولة من مصادر مختلفة في محافظة الديوانية و مقاومتها لمضادات حيوية مختلفة دراسة بأشراف الأستاذ المساعد الدكتور فراس سرحان عبد المياحي…..استهدفـت هـذه الدراسة عـزل وتشخيـص بكتريا Providencia spp. من مصادر متنوعة في محافظة الديوانية , إذ جمعت 1209 عينة تضمنت جمـع 791 عينة سريرية (قشع 305 عينة, حروق245 عينة , إدرار 174 عينة , براز 37عينة , جروح30 عينة), و 288 عينة بيئية ( فضلات الطيور116 عينة , مياه ملـوثة 107عينة , مياه شـرب الأبقار 33عيـنة , تـربـة32 عينة) , و 130عينة لحوم (اسماك 53 عينة , لحوم أبقار42 عينة , لحوم دجاج 35 عينه) للفتــرة من شهر تشـرين الأول 2016 إلى شهـر كانون الأول 2017.
أثبتت نتائـج الزرع المختبري والفحص المجهـري والاختبـارات الكيمـوحيـويـة والتشخيــص التأكيـدي باسـتـخـدام نظام API-20E system ونظام Vitek 2 system , و التشخيـص النهـائي باستعمال مـورثـة 16S rRNA gene التشخيصيـة عائدية 18 عـزلة لبكتـريا Providencia spp. (10 عـزلات للنوع P.alcalifaciens , 8 عـزلات للنوع P.rettgeri).
أُجـري اختبار الحساسية الدوائيـة لجميع العزلات في الدراسة الحالية تجاه 31 مضـادا حيويا والعائـدة لـ12 صنــف من أصناف المضادت الحيوية وكانت العزلات التي قاومت مضاداً واحداً من ثلاث أصناف على الأقل من المضادات الحيوية عدت من البكتريا ذات المقاومة المتعـددة للمضادات الحيوية (MDR). إذ أبدت العـزلات أعلى نسبـة مقاومـة% 100 لمضـاد Nitrofurantoin يليه المضـادات Ampicillin و Azthromycin بنسبـة %94.4 لكل منهما ثم مضـاد Amoxicillin / clavulanic acid بنسـبة 72.2% , كما بلغت نسبة المقاومة الجرثومية (44.4 % ,38.9 % , %33.3 , %33.3 , % 22.2, %16.7, %11.1 , %11.1) لمضادات Cephalexin, Ampicillin/sulbactam, Tetracycline ,Tigecycline , Piperacillin / tazobactam ,Nalidixic acid , Cefuroxime و Trimethoprim على التوالي , وسجلت مضادات Cefotaxime , Imipenemو Trimethoprim -Sulfamethaxazoleنسبة مقاومة بلغت 5.6% لكل منها, في حين أبدت البكتريا حسـاسية تامة بنسبة %100 لكل من مضادات Cefexime ,Ceftriaxon , Meropenem , Azteronam , Amikacin , Gentamicin, Tobramycin , Ciprofloxacin , Norfloxacin و Chloramphenicol أما مضادات Ticarcillin / clavulanic acid , Cefoxitin, Ceftazidime , Cefepime , Levofloxacin و Ofloxacin فكانت البكتريا حساسـة لها بنسبة %88.9, %61.1 , %94.4 , %94.4, %94.4 و %88.9 على التوالي .
وكانت هنالك فروق في نسب المقاومة لعدد من المضادات الحيوية إذ كانت نسب المقاومة التي أبدتها البكتريا تجاه مضادات Amoxicillin/clavulanic acid , Cefoxitin , Cefuroxime , Ciprofloxacin , Levofloxacin و Cefepime قد بلغت %72.2 , %0 , %11.1, %0,%0 و%0 على التوالي بالاعتماد على CLSI-2017 , بينما بلغت النسب %83.3 ,%44.4 , %16.7, %16.7, %11.1 و %5.6 لنفس المضادات و على التوالي بالاعتماد على. EUCAST-2017
أُخضعت العزلات المشخصة للتحـري عن قابليتها على إنتاج إنزيمات البيتا-لاكتاميز مظهريا إذ تم التحري عن إنتاج إنزيمات البيتا-لاكتاميز واسعة الطيـف ESBLs باستعمال طريقة الأقـراص المتاخمة و بلغـت نسبة إنتاجهـا 66.7% , أما قابليتهـا على إنتاج إنزيمات البيتا-لاكتاميز نوع AmpC فتم التحري عنها بطريقتين : التحـري الأولي للـ Cefoxitin و التحـري التأكيـدي Ceftazidime-Imipenem Antagonism Test (CIAT) وكانـت نسـبـة إنتاجهـا %44.4 و 37.5% عـلى التوالي .
وجرى التحـري عن إنتاج إنزيمات البيتا-لاكتاميز المعدنية (Metallo beta –lactamases) بطريقة Imipenem-EDTA و قد تبين أن 80 % من هذه العزلات كانت منتجة لهذه الإنزيمات كما استعمل اختبارا هـودج المحور Modified Hodge Testو Disc Potentiation Test إلا أنهما لم يعطيا نتيجة ايجابية .
تم التحـري عن بعض جينات المقاومة للمضـادات الحيـويـة بين عزلات Providencia spp. في الدراسـة الحاليـة جزيئياً باستعمال تقنيـة (PCR) وظهر أن العـزلات كانت حاملة لكل من مورثات blaCTX-M و blaOXA و blaSHV وبنسبة 77.8% , 50% و 5.6% على التوالي , فيما خلت من مورثات blaPER , blaTEM و blaNDM , و مورثة qnr المشفرة لمقاومة مضادات الكوينولون .
حُللت نتائج الشجرة الوراثية باستعمال برنامج MEGA 6 وباختيار طريقـة (Neighbor-Joining Method) لعزلاتProvidencia spp. المشخصة بواسطة تقنية (PCR) بالاعتماد على مورثة 16S rRNA gene و بحجم 546 زوج قاعدي وقد كانت نسبة المطابقة عالية بين الأنواع المحلية المشمولة بالدراسة الحالية مع نظيـراتها المسجلة عالميا في المركز الوطني لمعلومات التقنيات الإحيائية NCBI , وبينت الشجرة الوراثية وجود مجموعتين رئيسيتين الأولى تمثـل السلالات العائدة للنوع P .alcalifaciens بينما الثانية تمثل السلالات العائدة للنوع P.rettgeri مع وجود مسافات تمثل البعد الوراثي بين الأنواع العائدة لجنس Providencia spp..
